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纯化快枪手-径向色谱技术

更新时间:2022-11-23      点击次数:731

01径向色谱技术

径向流色谱柱流动相携带样品沿径向迁移。在径向流色谱柱内,流动相和样品可以从色谱柱的周围流向柱圆心,也可以从柱圆心流向柱的周围。

基于径向流色谱技术。柱子有三个环形通道(如Figure.1),内外通道横截面积相等并将流体引至出口,中间通道装载色谱填料。

 

Superflo®柱基于径向流色谱技术。由于外通道的横截面积较大且床层深度较低,所以Superflo®柱可支持非常高的流速和非常低的运行压力。
 

径向工艺和传统轴向工艺分离卵清蛋白的系统压力比对

Peter R L∙ Large-scale ion-exchange column chromatography of proteins Comparison of different formats[J]∙Journal of Chromatography B,2003,790:17~33

 

径向层析工艺(Radial)运行时的系统压力显著低于同体积的传统轴向工艺(Axial,尤其是工艺放大后的高体积流速表现更佳。

与传统色谱柱相比,径向色谱优势明显,具体如下:

 


02径向色谱有多快

案例1:阴离子交换分离大肠杆菌表达胞内酶

 

微信图片_20221118124909.png

 

CourtesyGenencor Corp

图中可见,径向色谱层析时间相对于传统轴向色谱缩短了约7倍,并且处理了更大体积的样品,效率获得巨大提升。

 

案例2:径向工艺和传统轴向工艺疏水层析柱分离蛋白比对

CourtesyUniversity of Nebraska

表中可见,传统轴向工艺层析时间是径向工艺的18倍。

 

03径向流技术的高流速会影响载量吗?

填料动态载量受到结合流速影响,径向色谱技术得益于其设计可以大幅提升线性速度,但这是否会带来动态载量的显著下降?答案是否定的,请见以下数据。

4种填料对于径向色谱保留时间的测试

使用图中4种填料进行径向色谱保留时间的测试,保留时间分别设置2、4、8min,数据如下所示:

表中可见,保留时间由8min降低至2min, 效率提升4倍,动态载量依然保持在80%左右,另外个别厂商装柱高度较高,反压大,保留时间甚至超过10min, 这种情况使用径向色谱具有更加广阔的效率提升空间。

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