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还在加班做纯化?径向色谱让你远离加班

更新时间:2022-11-30      点击次数:747
做纯化加班是家常便饭

生物制品原液的纯化工艺开发及生产制备是药品研发及生产中不可少的环节,尤其对于重组蛋白类或病毒载体类生物制品。纯化流程通常包括缓冲液配制、装柱及平衡、样品准备、上样、淋洗、洗脱、收样、柱再生、仪器冲洗等环节,工序复杂、耗时费力。

 

通常生物大分子娇弱的性质导致纯化工序一般不能中断,必须连续操作,对于工艺复杂的制品,从上游发酵到原液制备往往能达到十数天,而加班就如同家常便饭,起早贪黑、披星戴月就是日常操作。

 

难道就没有一种办法解救一下科研狗吗?当然不是。

 

 

径向层析技术
什么是径向层析技术?

 

 

三十多年前,Sepragen发明了径向流色谱技术,该技术不同于传统的轴向流色谱技术,其流体在柱内从一端流向另一端,径向流色谱柱流动相携带样品沿径向迁移。在径向流色谱柱内,流动相和样品可以从色谱柱的周围流向柱圆心,也可以从柱圆心流向柱的周围。

 

基于径向流色谱技术。柱子有三个环形通道(如Figure.1),内外通道横截面积相等并将流体引至出口,中间通道装载色谱填料。

这种径向流设计使色谱柱非常适合高通量分离技术,如离子交换色谱技术、亲和色谱技术、疏水色谱技术、反相色谱技术和其他形式的吸附-解吸色谱技术。

Figure.1

 

 

径向色谱有什么优势

 

Superflo®柱基于径向流色谱技术。由于外通道的横截面积较大且床层深度较低,所以Superflo®柱可支持非常高的流速和非常低的运行压力。

 

与传统色谱柱相比,其优势明显,具体如下:
  • 反压更低、流速更快,层析时间节省4倍

  • 易于放大,放大后占地更小

  • 更好的柱效及分离趋势

  • 防止浓度依赖沉淀和蛋白降解,提高收率

  • 易于使用,无需拆卸即可实现填料安装和卸除

 

 

径向色谱怎么就能这么快?

 

对于传统层析柱,装柱高度通常介于10-30cm,个别友商甚至高于30cm, 较高的填装高度带来较大的反压,较低的线性流速,导致层析时间的延长。

 

径向色谱技术由于设计,中试柱床深(相当于传统柱的柱高)低至5cm,生产级别低至10cm, 较低的床深带来较低的反压、更快的线性流速,另外其填料上表面积显著大于下表面积,进一步利于降低反压及提升线性流速,通常径向色谱柱层析时间相比传统柱能节省4倍以上。